Effects of Storage: Whole Blood Specimens for CD4-T Lymphocytes Determination in Yaoundé, Cameroon

Résumé

ABSTRACT Introduction. Stored blood specimens collected in Ethylene Diamine Tetra Acetic Acid (EDTA) anti-coagulant tubes for CD4 T-Cell determinations are inevitable practices in Cameroon and many other countries worldwide. This study aimed to evaluate the reproducibility of results obtained from blood samples stored at room temperature (25° C) and 4° C within six days post collection. Methods. Whole blood samples collected in EDTA collection tubes were analyzed for CD4 absolute counts using the FACS Count Machine (Becton Dickinson, France). We Used the FACS Count reagent kit (CD4, CD8 and CD3 combine). Samples were strictly analyzed using the procedural manual of the kit .Freshly collected blood samples in day one served as control. Results. There was a significant correlation with results obtained at day 2 and 3 (47 and 72 hours).Day 4, 5, 6 (72, 96 and 120 hours) did not show any correlation with day one. Blood samples stored at -4°C degrees did not correlate with any other day. Conclusion. Reproducibility of CD4 cell count could only be evaluated up to 72 hours, whereas blood samples stored in the fridge at -4°C were not reproducible after day one. Our findings can serve as a guide to clinical laboratories and health care providers handling samples in rural and urban settings. RESUME Introduction. La conservation des echantillons de sang preleves dans les tubes contenant l’anticoagulant Ethylene Diamine-Tetra-Acetique (EDTA) pour la determination du taux de lymphocytes T CD4 sont des pratiques courantes au Cameroun et dans de nombreux pays du monde .Cette etude visait a evaluer la reproductibilite des resultats obtenus a partir des echantillons de sang stockes a temperature ambiante (25°C) dans les six jours suivant la collecte. Methodologie. Les echantillons de sang total collectes dans des tubes EDTA ont ete analyses afin de determiner le nombre absolu de CD4 en utilisant l’appareil FACS Count (Becton Dickinson, France).Nous avons utilise le kit de reactifs FACS Count (CD4, CD8 et CD3 combines). Les echantillons ont ete analyses en respectant la procedure decrite par le fabriquant du kit. Les echantillons de sang fraichement preleves au jour 1 ont servi de temoins. Resultats. Nous avons trouve une correlation significative entre les resultats obtenus au jour 2 et 3 (47 et 72 heures). Il n’y avait pas de correlation entre les jours 4, 5, 6 (72, 96 et 120 heures) et le jour un. Les resultats des echantillons de sang stockes a - 4°C n’ont ete correles avec ceux d’aucun autre jour. Conclusion. La reproductibilite du nombre de cellules CD4 ne peut etre evaluee que jusqu'a 72 heures, alors que les echantillons de sang stockes dans le refrigerateur a - 4°C ne sont pas reproductibles apres le premier jour. Nos resultats peuvent servir de guide aux laboratoires cliniques et aux prestataires de soins de sante manipulant des echantillons en milieu rural et urbain.

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